Анализ на цитомегаловирус (цмв) — Расшифровка и результаты

Иммуноферментный анализ (ИФА) крови

Комментариев нет 6,177

Цитомегаловирус или CMV — распространенный вирус из семейства герпесвирусов. Один из эффективных методов его обнаружения — полимеразная цепная реакция или ПЦР.

Диагностика вируса производится высокоточной техникой, работающей на молекулярно-генетическом уровне. ЦМВ выявляется в хронической/острой фазе или латентной стадии (когда заболевание себя еще не проявило). ПЦР иногда является единственным тестом определения инфекции, когда остальные техники не работают.

Самым распространенным методом обнаружения вируса является ИФА (иммуноферментный анализ) крови. Диагностика этим методом позволяет выявить антитела и некоторые их характеристики. Антитела – это вещества, которые образуются в организме человека при заражении инфекцией.

ИФА является косвенным методом диагностики, позволяющим выявить следы пребывания вируса в организме и его состояние.

Для подготовки сдачи крови на ИФА используется стандартная схема, которую применяют при любых других анализах, определяемых через сыворотку крови. Пациенту предстоит сдать венозную кровь, поэтому:

  1. За 12 часов до анализа нельзя принимать пищу (за двое суток следует исключить высокоаллергенные продукты) во избежание ложного иммунного ответа.
  2. За сутки не следует употреблять алкоголь и заниматься тяжелыми физическими нагрузками.
  3. Следует соблюдать обычный режим сна.
  4. За несколько часов до сдачи крови необходимо воздерживаться от курения и стрессов.
  5. В сутки после сдачи крови также не следует перенапрягаться, допускать недосып, употреблять алкоголь.

Иммуноферментный анализ на цитомегаловирус выявляет антитела двух типов: IgG и IgM. Первый тип, IgG, показывает наличие подавленной инфекции в организме. Этот тип антител образуется тогда, когда острая фаза заражения уже позади, и вирус перешел в хроническую стадию. У этих антител также выявляется показатель авидности – это степень связи антигенов с антителами, по которой можно приблизительно определить срок заражения.

С одной стороны, обнаружение этих антител – хороший знак, ведь у организма уже образовался иммунитет к инфекции, а значит, состояние вируса относительно стабильно. С другой стороны (и это важно для пациентов, которых готовят к трансплантации органов) – вирус уже находится в организме, а значит, есть риск вторичного заражения.

Антитела типа IgM – это показатель острой стадии течения болезни. Они появляются в организме сразу после заражения и остаются циркулировать в крови в течение 3-8 месяцев. Однако в некоторых случаях они могут оставаться там и на более длительное время, в зависимости от показателей иммунитета конкретного пациента, поэтому во избежание ошибки в сроках заражения для сравнения также берутся показатели IgG и их авидность.

Из всех перечисленных анализов по применимости результатов, срокам исследования и простоте для пациента лидирует метод ИФА. Этот анализ обладает прогностической ценностью, высокой точностью результатов, и при этом его получение не занимает таких длительных сроков, как, к примеру, культуральный метод. Кроме того, этот вид анализа экономически выгоден как для пациента, так и для лаборатории.

Анализ на антитела к цитомегаловирусу (ИФА – твердофазный иммуноферментный анализ)

Пути заражения довольно разнообразны – у взрослых возбудить может передаваться при половом сношении, у новорожденных в процессе родовой деятельности матери либо при лактации, цитомегаловирус у ребенка постарше проявляется после общения с зараженными сверстниками, проникая в организм со слюной. Несмотря на то, что патология может быть обнаружена у ребёнка, в 50% случаев страдают люди, возраст которых составляет 35 и более лет.

ПЦР цитомегаловируса положительный и отрицательный расшифровка

Учитывая все выше сказанное, можно выделить определенные категории среди населения, которым анализ на цитомегаловирус показан в первую очередь:

  • Женщинам, вынашивающим ребенка и тем представительницам слабого пола, которые проходят предгравидарную подготовку (комплекс мероприятий, направленных на полноценное зачатие, период беременности и появление на свет здорового младенца).
  • Новорожденным младенцам.
  • Детям, у которых часто наблюдается ОРВИ.
  • Пациентам, у которых наличествует иммунодефицит как врожденный, так и приобретенный и ВИЧ в том числе.
  • Пациентам всех возрастов с наличием злокачественных новообразований.
  • Пациентам, принимающим цитостатики.
  • Пострадавшим с клиническими симптомами цитомегаловируса.

Женщинам, планирующим зачатие либо уже тем, которые становятся на учет на ранних этапах беременности, анализ на цитомегаловирус делается сразу при посещении медучреждения. При этом необходимо проведение анализа на антитела к цитомегаловирусу, который помогает выявить их количество и определить, наблюдался ли у женщины этот вирус ранее, и имеется ли иммунитет к возбудителю.

Если анализ на цитомегаловирус показывает наличие антител Anti-CMV IgG, опасность для плода сведена к минимуму – будущая мама уже переболела патологией и выработала защиту, которая обезопасит и младенца. В случае отсутствия иммуноглобулинов обследование на вирус придется проходить не один раз на протяжении беременности, поскольку организм не подготовлен к сопротивлению инфекции.

У младенцев, только появившихся на свет, анализ крови на цитомегаловирус либо исследование мочи проводят в случае, если при наблюдении за беременной женщиной наличествует подозрение на возможность врожденной инфекции либо приобретенной при родах патологии. Диагностику проводят в первые 24-48 часов после появления ребенка на свет.

Предлагаем ознакомиться:  Анализ крови на аскариды расшифровка

При наличии иммунодефицита проверку проводят непосредственно после его выявления. Такой подход позволит провести коррекцию терапевтического курса и дополнить схему нужными противовирусными лекарствами, избегая вместе с тем возможного рецидива либо подготавливаясь к не исключенному первичному заражению.

Анализ на ЦМВ необходим и при подготовке пациента к проведению иммуносупрессии при трансплантации органов либо тканей, при этом исследование назначают до начала процедуры.

При первичной инфекции заражение плода цитомегаловирусом наступает в 30-40% случаев, а по некоторым данным европейских ученых, инфицирование плода может наблюдаться в 75% случаев. При реактивации текущей инфекции передача вируса плоду наблюдается только в 2% случаев, хотя есть данные, свидетельствующие о гораздо большей вероятности поражения. Врожденная ЦМВ-инфекция присутствует у 0,2-2% всех новорожденных детей.

Существуют три основных механизма передачи вируса плоду:

  1. эмбрион может быть инфицирован вирусом из спермы;
  2. цитомегаловирус может проникать из эндометрия или цервикального канала через плодовые оболочки и инфицировать околоплодные воды, а затем и плод;
  3. цитомегаловирус может инфицировать плод трансплацентарно.
  4. возможно заражение в процессе родов.

(разные исследования по-разному оценивают вероятность того или иного пути заражения.) 

Вирус ЦМВ-инфекции передается плоду через плаценту в любой период беременности одинаково (хотя вероятность реактивации латентной инфекции в материнском организме выше в III триместре). Если заражение матери произошло в первом триместре, то у 15% этих женщин беременность заканчивается спонтанным выкидышем без вирусного поражения самого эмбриона, то есть инфекционный процесс находят только в плаценте.

В ранние сроки беременности самопроизвольный выкидыш при поражении цитомегаловирусом происходит в 7 раз чаще, чем в контрольной группе.

Передача вируса плоду в ряде случаев приводит к

  • рождению ребенка с низкой массой тела,
  • развитию инфекции с внутриутробной гибелью плода (невынашивание, спонтанные аборты, мертворожденность – до 15%),
  • рождению ребенка с врожденной ЦМВИ, которая проявляется пороками развития (микроцефалия, водянкой головного мозга, желтухой, увеличением печени, селезенки, гепатитами, пороками сердца, паховой грыжей, врожденными уродствами),
  • появлению на свет ребенка с врожденной ЦМВИ, которая проявится не сразу, а на 2-5 году жизни (слепотой, глухотой, речевым торможением, отставанием в умственном развитии, психомоторными нарушениями).

Исключить передачу цитомегаловируса плоду можно, если оба партнера-носителя ЦМВ проходят курс терапии  до зачатия ребенка.

Цитомегаловирусная инфекция способна спровоцировать появление в организме матери антифосфолипидов, которые будут атаковать клетки ее организма (аутоагрессия). Это очень опасное ослжнение цмв. Антифосфолипиды могут повреждать сосуды плаценты и нарушать маточно-плацентарный кровоток.

Анализ на антитела к ЦМВ включает определение двух специфических иммуноглобулинов: IgM и IgG. Про IgM пишут “положительно” или “отрицательно” (качественная характеристика), у IgG определяют титр (количественная характеристика).

Антитела IgM появляются в крови при первичном заражении (всегда, однако их появление может задержаться до 4 недель) и при активиции уже существующей инфекцтии (в 10% случаев). Если в анализе ЦМВ написано “IgM  – положительно”, это означает, что инфекция активна. На фоне активной ЦМВ беременеть нельзя!!!

В этом случае следует определять уровень антител IgM в динамике (количественный метод), чтобы узнать, растут у вас титры IgM или падают, и, соотвественно, на каком этапе находится инфекция. Быстрое падение титров IgM означает недавнее инфицирование/обострение, медленное указывает на то, что активная фаза инфекции миновала.

Если  IgM  не находят в сыворотке крови инфицированного человека, то это свидетельствует о том, что заражение произошло как минимум за 15 месяцев до момента диагностики, однако совершенно не исключает текущую реактивацию вируса в организме, то есть отстутствие IgM  в анализе крови не дает оснований считать, что можно приступать к зачатию!

Требуются дополнительные исследования (см. ниже). Вопрос: зачем тогда вообще сдавать этот анализ? Ответ: он все же способен выявить активную форму вируса и недорог. В некоторых ситуациях, как следствие очень высокой чувствительности тестов, возможны ложноположительные результаты при определении IgM .

Если человек никогда не встречался с ЦМВ, то титр IgG будет ниже референстного значения, указанного на бланке анализа. Это означает высокий риск заражения ЦМВ во время беременности. Женщины, у которых отсутствует титр IgG к ЦМВ, входят в группу риска!

После первичного заражения ЦМВ антитела IgG остаются в крови пожизненно. Но это – не иммунитет к цитомегаловирусу! Наличие IgG допускает возможность реактивации инфекции на фоне ослабленного беременностью иммунитета. После инфицирования/реактивации титры IgG растут (об активации ЦМВ свидетельствует увеличение титра в 4 и более раз относительно базового уровня, свойственного данному пациенту), потом ОЧЕНЬ МЕДЛЕННО падают.

Предлагаем ознакомиться:  Борьба с острицами народными средствами

Уровень латентных антител IgG зависит как от состояния вируса на данный момент, так и от состояния иммунитета человека, поэтому однократный анализ, показавший наличие в организме антител Ig G даже в значениях, в несколько раз превышающих референсное, не указывает однозначно на обострение ЦМВ.

Первичная инфекция или реактивация? В случае, когда IgM  положительно, следует определить авидность антител IgG. Авидность (лат. – avidity) – характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами. В ходе иммунного ответа организма IgG-антитела обладают поначалу низкой авидностью, то есть достаточно слабо связывают антиген.

Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоавидных IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами.  Низкоавидные IgG-антитела (индекс авидности (ИА) до 35%), в среднем, выявляются в течение 3-5 месяцев от начала инфекции (это может в определенной степени зависеть от метода определения), но иногда вырабатываются и в течение более длительного срока.

Само по себе выявление низкоавидных IgG-антител не является безусловным подтверждением факта свежего инфицирования, но служит дополнительным подтверждающим свидетельством в ряду остальных серологических тестов. Высокая авидность специфических IgG-антител (индекс авидности больше 42%) позволяет исключить недавнее первичное инфицирование.

Однако анализ крови на антитела, особенно единичный, не может дать достаточной информации о течении цитомегаловирусной инфекции в организме. При положительном результате анализа на антитела обычно применяют еще какой-либо из методов, как на подтверждение наличия антител, так и на наличие самого активного вируса.

Вероятность заражения плода прямо пропорциональна  концентрации вируса в крови. При этом не имеет значения, первичная это инфекция или реактивация, важна именно концентрация вируса. Концентрация вируса определяется уровнем защитных антител: чем больше антител, тем ниже концентрация вируса. У людей, впервые столкнувшихся с цмв, антител нет, и поэтому концентрация вируса высока, а значит, и заражение плода наиболее вероятно.

У носителей цмв антитела есть, и концентрация вируса в крови ниже. Исключение представляют беременные, получающие иммуносупрессивную  терапию (обычно метипред). Метипред подавляет выработку в организме всех видов антител, а значит, защита от цмв оказывается слабее, чем могла бы быть в отсутствии метипреда, и вероятность передачи вируса плоду увеличивается.

Положительный результат IgM при беременности

Расшифровка анализа по форме представляет собой титр антител IgG. Как мы упоминали выше, норма для этого показателя не предусмотрена – он может колебаться на фоне:

  • состояния иммунной системы;
  • наличия хронических патологий;
  • общего состояния организма;
  • привычного образа жизни.

Следует учитывать, что IgG генерируется не только при заражении, но и в периоды обострения, также он остается в организме после перенесенной патологии. По этим причинам результаты анализа на цитомегаловирус могут вызывать сомнения, и исследования биоматериалов часто проводятся повторно.

Современные лаборатории располагают многочисленными системами, позволяющими находить антитела к цитомегаловирусу. Их чувствительность различна, как и состав компонентов. Но имеется и общая черта – все они рассчитаны на проведение иммуноферментного анализа. Установленные нормы в этом случает также отсутствуют.

Расшифровка результатов по ИФА проводится на основе уровня окрашивания жидкости, в которую добавляют исследуемые биоматериалы. Образовавшийся цвет сравнивают с предварительно приготовленными образцами, как положительными, так и отрицательными.

Для более быстрой расшифровки лаборанты используют тест-систему с задействованием положенного разведения крови, что позволяет несколько сократить период получения результатов. Любой медицинский центр пользуется собственными титрами для проведения диагностики, применяя референтные показатели, которые выдают либо отрицательный, либо положительный результат.

Даже в том случае, когда антитела к цитомегаловирусу обнаруживались ранее, специалистом для уточнения диагноза могут применяться дополнительные методы диагностики.

Отдельного рассмотрения требуют результаты анализов женщин, вынашивающих ребенка. Поговорим о расшифровке показателей при наличии беременности, в этом случае большое значение имеет срок, на котором производился отбор биоматериала:

  • Даже при получении благоприятных результатов позднее четвертой недели вынашивания ребенка потребуется дополнительное обследование, поскольку данные нельзя считать абсолютно однозначными. Инфицирование могло затронуть организм как 12 месяцев назад, так в начале беременности, что чревато поражениями зародыша.
  • Следует учитывать, что чрезмерно повышенный титр IgG в большей части случаев говорит о настойчивой борьбе организма с инфекцией, не являясь подтверждением опасности.
  • В тех случаях, когда у вынашивающей ребенка женщины обнаруживают в крови IgM наряду с низко авидными IgG следует разработать специальное лечение и впоследствии внимательно наблюдать, как развивается плод.
Предлагаем ознакомиться:  Результаты анализов на токсоплазмоз расшифровка результатов

При отсутствии специфических к вирусу антител беременной женщине необходимо повысить осторожность и в течение месяцев вынашивания ребенка еще не один раз проверять наличие или отсутствие цитомегаловируса.

За последние тридцать лет во многих лабораториях мира разработано очень много диагностических методов по выявлению ЦМВ в организме человека. Диагностическое исследование у беременных женщин важно проводить при малейшем подозрении на наличие цитомегаловирусной инфекции, особенно при неблагоприятном исходе предыдущей беременности и при клинической манифестации (симптомах) ЦМВ-инфекции.

Этот метод диагностики цитомегаловируса основан на выявлении ДНК возбудителя инфекции, так как цитомегаловирус относится к ДНК-содержащим вирусам. Материалом для исследования могут являться выделения из мочеиспускательного канала, шейки матки, влагалища, моча, слюна, спинномозговая жидкость. Время от взятия материала для исследования до получения результатов обычно составляет 1-2 суток, и это основное преимущество метода ПЦР перед методом культуральной диагностики (посевом).

Метод ПЦР благодаря своей высокой чувствительности выявляет даже отрезок ДНК ЦМВ и считается весьма прогрессивным. Наиболее важное его преимущество — возможность диагностики ранних стадий процесса, латентной и персистирующей инфекции, однако он имеет низкую прогностическую ценность, связанную именно с тем, что ПЦР выявляет ДНК вируса даже в латентном состоянии. Другими словами, этот метод не отличает активный вирус от спящего.

Качественное и количественное определение ДНК ЦМВ практически в любой жидкости человеческого организма имеет точностью до 90-95% – в случае, если именно в этой ткани вирус сейчас имеется. Особенностью ЦМВ является его необязательное присутствие во всех биологических жидкостях сразу.

Обнаружение ЦМВ методом ПЦР в биологических тканях человека не позволяет определить, является ли инфекция первичной или повторной реактивацией текущей инфекции.

Это диагностический метод, при котором исследуемый материал, взятый из крови, слюны, спермы, выделений из шейки матки и влагалища, околоплодных вод, помещается в специальную питательную среду, благоприятную для роста микроорганизмов. Недостаток этого метода в том, что получение результатов требует большого количества времени: неделю и больше.

Положительный анализ (“вирус выявлен”) имеет 100% точность, отрицательный может быть ложным.

Цитологическое исследование позволяет выявить типичные гигантские клетки с внутриядерными включениями, однако не является достоверным методом диагностики ЦМВ инфекции.

В настоящее время выявление культуры вируса в околоплодных водах (посев) и полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяют поставить правильный диагноз в 80-100% случаев. Уровень всех вирусологических параметров (вирэмия, антигэнемия, ДНК-эмия и др.) в крови плодов, имеющих отклонения в развитии, выше, чем у плодов, у которых не найдено отклонений от нормы.

Также, уровень специфических иммуноглобулинов IgM у нормально развивающихся плодов намного ниже уровня этих антител у детей с отклонениями в развитии. Эти данные позволяют предположить, что врожденная ЦМВ-инфекция у инфицированных плодов с нормальными биохимическими, гематологическими и ультразвуковыми признаками, а также с низким уровнем генома вируса и антител к нему, имеет более благоприятный исход.

Определение вирусной ДНК в околоплодных водах может стать неплохим прогностическим фактором: ее уровень ниже, если у плода не найдено отклонений в развитии.Отрицательные результаты анализов не являются достоверным признаком отсутствия инфекции у плода.Риск передачи вируса от матери к ребенку во время диагностических процедур при наличии активного вируса у матери небольшой.

Таким образом, иммуноферментный анализ позволяет с точностью определить не только наличие цитомегаловируса, но и прошедший с момента заражения срок. Важно оценить наличие обоих основных видов иммуноглобулинов, поэтому антитела IgM и IgG рассматриваются вместе.

IgM IgG Значение
Человек никогда не сталкивался с цитомегаловирусом, поэтому иммунная система с ним «не знакома». Учитывая, что заражены им практически все люди, ситуация весьма редка.
Нормальный показатель для большинства людей. Означает, что контакт с вирусом был в прошлом, и организм выработал постоянную защиту против него.
Острая первичная инфекция — заражение произошло недавно, активизировались «быстрые» иммуноглобулины, но постоянной защиты от ЦМВ еще нет.
Обострение хронической инфекции. Оба вида антител активизируются, когда организм встречался с вирусом ранее и выработал постоянную защиту, но она не справляется со своей задачей. Такие показатели говорят о серьезном ослаблении иммунитета.

Особое внимание положительному результату на антитела IgM следует обратить беременным женщинам. Если присутствуют иммуноглобулины IgG, беспокоиться не о чем; острая же инфекция несет опасность для развития плода. Осложнения в таком случае проявляются в 75% случаев.

Кроме собственно наличия антител при иммуноферментном анализе оценивается коэффициент авидности белков — их способность связываться с антигенами, которая уменьшается по мере их разрушения.

Расшифровываются результаты исследования авидности следующим образом:

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!:

c